عام طور تي پي سي آر تجربن ۾ استعمال ٿيل ڪيترائي اينزيما

پوليمرس زنجير ردعمل، مختصر طور تيپي سي آرانگريزيءَ ۾، هڪ ماليڪيولر بايولوجي ٽيڪنڪ آهي، جيڪا مخصوص ڊي اين اي ٽڪڙن کي وڌائڻ لاءِ استعمال ڪئي ويندي آهي.اهو جسم کان ٻاهر هڪ خاص ڊي اين اي جي نقل جي طور تي سمجهي سگهجي ٿو، جيڪو تمام گهڻو وڌائي سگھي ٿو ڊي اين اي جي تمام گهٽ مقدار ۾.سڄي عرصي دورانپي سي آررد عمل جي عمل ۾، مادي جو هڪ طبقو هڪ اهم ڪردار ادا ڪري ٿو - اينزيمس.

1. طاق ڊي اين اي

جي شروعاتي ڏينهن ۾ تجربن ۾پي سي آرسائنسدانن Escherichia coli DNA polymerase I استعمال ڪيو، پر هن اينزائم سان هڪ مسئلو آهي: ان کي هر دفعي نئين انزائم کي ڀرڻ جي ضرورت آهي جڏهن هڪ چڪر ڪيو وڃي ٿو، جيڪو آپريشن جي مرحلن کي ٿورڙو پيچيده بڻائي ٿو ۽ مڪمل طور تي خودڪار طور تي وڌائڻ ڏکيو آهي.اهو مسئلو تڏهن حل ٿي ويو جڏهن سائنسدانن 1988ع ۾ ٿرمس ايڪواٽيڪس مان ٽاڪ ڊي اين اي پوليمريز کي غلطيءَ سان ڌار ڪيو. ان وقت کان وٺي، ڊي اين اي جي خودڪار واڌ ويجهه هڪ حقيقت بڻجي وئي آهي.هن اينجيم جي دريافت پڻ ڪري ٿيپي سي آرٽيڪنالاجي هڪ آسان، عملي ۽ آفاقي ٽيڪنالاجي.في الحال، Taq DNA پوليمريز ڊي اين اي ڪٽس ۾ سڀ کان وڌيڪ عام پوليمريز آهي.

2. PfuDNA

جيئن مٿي ذڪر ڪيو ويو آهي، Taq DNase ۾ هڪ وڏو بگ آهي، تنهن ڪري سائنسدانن هڪ خاص حد تائين Taq DNA پوليمريز کي تبديل ڪيو آهي ته جيئن غير مخصوص ايمپليفڪيشن کان بچڻ لاءِ، غلط ٽيسٽ جا نتيجا نڪتا.پر تاق ڊي اين اي پوليمريز جي تبديلي ڪمري جي حرارت تي ڊي اين اي پوليمريز جي سرگرمي کي روڪي سگھي ٿي.PfuDNA پوليمريس طاق ڊي اين اي پوليميرس جي مٿين نقصانن کي چڱي طرح پورو ڪري سگھي ٿو، ته جيئن پي سي آر جي رد عمل کي عام طور تي انجام ڏئي سگهجي، ۽ ٽارگيٽ جين ايمپليفڪيشن جي ڪاميابي جي شرح کي بهتر ڪري سگهجي ٿو.

3. ريورس ٽرانسڪرپٽ

Reverse transcriptase 1970 ۾ دريافت ڪيو ويو. ھي اينزائيم آر اين اي کي ٽيمپليٽ طور استعمال ڪري ٿو، ڊي اين ٽي پي ھڪ سبسٽريٽ جي طور تي، بيس پيئرنگ جي اصول تي عمل ڪري ٿو، ۽ 5′-3′ طرف ۾ RNA ٽيمپليٽ کي مڪمل ڪندڙ ڊي اين اي سنگل اسٽرينڊ کي گڏ ڪري ٿو.ريورس ٽرانسڪرپٽ بنيادي طور تي ڊي اين اي يا آر اين اي ٽيمپليٽس مان ڊي اين اي پوليمريز سرگرمي تي منحصر آهي ۽ ان ڪري 3′-5′ exonuclease سرگرمي ناهي.بهرحال، ان ۾ RNase H سرگرمي آهي، جيڪا ريورس ٽرانسڪرپٽ جي جوڙجڪ جي ڊيگهه کي هڪ خاص حد تائين محدود ڪري ٿي.جهنگلي ريورس ٽرانسڪرپٽ جي گھٽ وفاداري ۽ حرارتي صلاحيت جي ڪري، سائنسدان پڻ ان کي تبديل ڪيو.

لاءِپي سي آرتجربا، مکيه استعمال جون شيون آهن: انفرادي پي سي آر ٽيوب، 4/8-پٽي پي سي آر ٽيوب، پي سي آر پليٽ.

لابيوپي سي آر استعمال ٿيندڙ سامانهيٺيون آهنفائدا:

PCR پليٽ: وسيع تھرمل سائيڪلر مطابقت؛اعلي-برعڪس، آسان چڱي طرح سڃاڻپ؛چڱي طرح fluorescence عڪاسي؛ سٺوگرمي جي منتقلي؛تصديق ٿيل DNase، RNase، DNA، PCR inhibitors، ۽ آزمائشي پيروجن فري.

انفرادي PCR ٽيوب: بخار جي مزاحمتي؛ سٺوگرمي جي منتقلي؛شاندار نظرياتي وضاحت؛ تصديق ٿيل DNase، RNase، DNA، PCR inhibitors، ۽ آزمائشي پيروجن فري.

4/8-پٽيون PCR ٽيوب: الٽرا پتلي ديوارون؛ اعليٰ وضاحت؛ سٺي فلورسنس موٽ؛دواسازي جي صنعت، کاڌي جي صنعت، ۽ ماليڪيولر حياتيات ۾ استعمال ڪري سگھن ٿا؛ اعليٰ معيار، ورجن پي پي مواد؛ تصديق ٿيل DNase، RNase، DNA، PCR inhibitors، ۽ آزمائشي پيروجن فري.